安捷倫色譜柱要怎么用才是正確的?
瀏覽次數:1557發布日期:2020-08-24
安捷倫色譜柱是親水相互作用色譜柱,它的保留模式類似于正相,并且突破了正相模式的溶劑限制,使用反相系統,并且峰在正相序列中。通過親水相互作用,可以有效地從反相色譜柱中分離出由于保留能力弱而難以分離的強極性化合物。這是一種分離機制,并且該分離機制有很多鍵合相,固定相為極性,流動相中的水相為強洗脫液,這與傳統的反相色譜法*相反。
1、獲得色譜柱后,請先閱讀手冊,以了解色譜柱的具體性能:溫度耐受性,pH耐受性等,以及色譜柱的洗滌和儲存條件。經過色譜柱校準測試后,在確認色譜柱本身沒有問題后,色譜柱即可正常使用。
2、樣品應進行充分預處理,以確保樣品清潔;應使用保護柱或在線過濾器,并應根據實際情況更換保護柱芯或過濾器件。
3、安捷倫色譜柱避免了壓力和溫度的劇烈變化以及任何機械振動。
4、溶劑的組成應逐漸變化,尤其是在反相色譜中在流動相中使用緩沖鹽時,避免鹽析。
5、應選擇合適的流動相,以避免破壞固定相,避免pH值低,共價鍵斷裂,鍵和相水解以及pH值過高,硅膠溶解。
6、在使用色譜柱的過程中,如果壓力升高或發生污染,請選擇適當的沖洗或反沖洗條件。
同時,安捷倫色譜柱與陰離子和陽離子的靜電相互作用弱,對目標的選擇性不同;提供氫鍵,分子和靜電吸引的多種作用;可以為強極性目標提供適當的保留;使用水溶性有機相作為流動相可以顯著提高樣品在流動相中的溶解度,分離極性和親水性小分子靶標和基本藥物分子。